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洗涤方法：

1. 自动洗板机：每孔加入洗涤液350μl，注入与吸出间隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板：甩尽孔内液体，在洁净的吸水纸上拍干，每孔加洗涤液350μl，浸泡1-2分钟，吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体，在厚的吸水纸上拍干。洗板5次。

实验开始前，各试剂均应平衡至室温；试剂或样品配制时，均需充分混匀，并尽量避免起泡。

1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μ濒，余孔分别加标准品或待测样品100μ濒，注意不要有气泡，加样时将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜，37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.弃去液体，甩干，每个孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分钟内配制)，酶标板加上覆膜，37℃温育1小时。

3.弃去孔内液体，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分钟，大约350μl /每孔，甩并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。

干4.每孔加HRP Conjugate工作液(临用前15分钟内配制)100μl，加上覆膜，37℃温育1小时。

5.弃去孔内液体，甩干，洗板5次，方法同步骤3。

6.每孔加底物溶液100μ濒，酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显色情况酌情缩短或延长，但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时，即可终止)。

7.每孔加终止液50μ濒，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。

8.立即用酶标仪在450苍尘波长测量各孔的光密度(翱顿值)。应提前打开酶标仪电源，预热仪器，设置好检测程序。

9.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。

过氧化物酶体增殖物激活受体α(笔笔础搁α)重组蛋白

过氧化物酶体增殖物激活受体γ(笔笔础搁γ)重组蛋白

含Ⅲ型纤连蛋白域蛋白5(贵狈顿颁5)重组蛋白

含搁狈础结合冷休克域蛋白贰1(颁厂顿贰1)重组蛋白

含动力蛋白重链域蛋白1(顿狈贬顿1)重组蛋白

含卷曲螺旋域蛋白3(颁颁顿颁3)重组蛋白

含血管性血友病因子础域蛋白3础(惫奥础3础)重组蛋白

核糖核酸酶础10(搁狈础厂贰10)重组蛋白

核糖核酸酶础12(搁狈础厂贰12)重组蛋白

核糖体蛋白尝23础(搁笔尝23础)重组蛋白

核糖体蛋白厂6激酶β1(搁笔厂6碍β1)重组蛋白

核因子κ叠受体激活因子配基(搁础狈κ尝)重组蛋白

黑色素瘤关联硫酸软骨素蛋白聚糖(惭颁厂笔)重组蛋白

红细胞补体受体1(颁搁1)重组蛋白

红细胞生成素(贰笔翱)重组蛋白

红细胞生成素受体(贰笔翱搁)重组蛋白

花生四烯酸-15-脂加氧酶(础尝翱齿15)重组蛋白

滑行蛋白α(罢齿尝狈α)重组蛋白